Kluczowa różnica - cytometria przepływowa vs FACS

W kontekście teorii komórek komórki są podstawową jednostką strukturalną i funkcjonalną wszystkich żywych organizmów. Sortowanie komórek jest metodologią stosowaną do oddzielania różnych komórek zgodnie z cechami fizjologicznymi i morfologicznymi. Mogą mieć cechy wewnątrzkomórkowe lub zewnątrzkomórkowe. Interakcje DNA, RNA i białek są uważane za wewnątrzkomórkowe właściwości interaktywne, podczas gdy kształt, rozmiar i różne białka powierzchniowe są uważane za właściwości pozakomórkowe. We współczesnej nauce metody sortowania komórek pomogły w różnych badaniach w badaniach biologicznych, a także w ustanowieniu nowych zasad poprzez badania w medycynie. Sortowanie komórek odbywa się przy użyciu różnych metod, które obejmują zarówno prymitywne z mniejszym wyposażeniem, jak i zaawansowane metodologie technologiczne z wykorzystaniem wyrafinowanych maszyn. Cytometria przepływowa, sortowanie komórek aktywowane fluorescencyjnie (FACS), selekcja komórek magnetycznych i sortowanie pojedynczych komórek to główne zastosowane metodologie. Opracowano cytometrię przepływową i FACS w celu różnicowania komórek zgodnie z ich właściwościami optycznymi. FACS to specjalistyczny typ cytometrii przepływowej. Cytometria przepływowa jest metodologią stosowaną podczas analizy niejednorodnej populacji komórek w zależności od różnych cząsteczek powierzchniowych komórek, wielkości i objętości, co pozwala na badanie pojedynczych komórek. FACS to proces, w którym próbka mieszaniny komórek jest sortowana zgodnie z ich właściwościami rozpraszania światła i fluorescencji w dwóch lub więcej pojemnikach. Jest to kluczowa różnica między cytometrią przepływową a FACS.

ZAWARTOŚĆ

1. Przegląd i kluczowa różnica 2. Co to jest cytometria przepływowa 3. Co to jest FACS 4. Podobieństwa między cytometrią przepływową a FACS 5. Porównanie obok siebie - Cytometria przepływowa a FACS w formie tabelarycznej 6. Podsumowanie

Co to jest cytometria przepływowa?

Cytometria przepływowa jest metodą stosowaną do badania i określania ekspresji cząsteczek wewnątrzkomórkowych i powierzchni komórki oraz do definiowania i charakteryzowania różnych typów komórek. Służy również do określania objętości i wielkości komórek oraz oceny czystości izolowanych subpopulacji. Pozwala to na ocenę wielu parametrów pojedynczych komórek w tym samym czasie. Cytometria przepływowa jest stosowana do pomiaru intensywności fluorescencji, która jest wytwarzana dzięki fluorescencyjnie znakowanym przeciwciałom, które pomagają w identyfikacji białek lub ligandów, które wiążą się z powiązanymi komórkami.

Ogólnie cytometria przepływowa obejmuje głównie trzy podsystemy. Są to płyny, elektronika i optyka. W cytometrii przepływowej dostępnych jest pięć głównych składników, które są wykorzystywane w sortowaniu komórek. Są to: komórka przepływowa (strumień cieczy, który służy do ich transportu i wyrównywania komórek w procesie wykrywania optycznego), system pomiarowy (może być z różnych systemów, w tym lamp rtęciowych i ksenonowych, chłodzony wodą o dużej mocy lub niskoenergetyczne chłodzone powietrzem lasery lub lasery diodowe), ADC; System przetworników analogowo-cyfrowych, system wzmacniający i komputer do analizy. Akwizycja to proces, w którym dane są zbierane z próbek za pomocą cytometru przepływowego. W tym procesie bierze udział komputer podłączony do cytometru przepływowego. Oprogramowanie obecne w komputerze analizuje informacje podawane do komputera z cytometru przepływowego. Oprogramowanie ma również możliwość dostosowania parametrów eksperymentu kontrolującego cytometr przepływowy.

Co to jest FACS?

W kontekście cytometrii przepływowej sortowanie komórek aktywowane fluorescencją (FACS) jest metodą stosowaną do różnicowania i sortowania próbki mieszaniny komórek biologicznych. Komórki są oddzielone od dwóch lub więcej pojemników. Metoda sortowania opiera się na cechach fizycznych komórki, które obejmują właściwości rozpraszania światła i fluorescencji komórki. Jest to ważna technika naukowa, którą można wykorzystać do uzyskania wiarygodnych wyników ilościowych i jakościowych sygnałów fluorescencyjnych emitowanych z każdej komórki. Podczas FACS początkowo uzyskana mieszanina komórek; zawiesina jest skierowana na środek wąskiego strumienia cieczy, która płynie szybko. Przepływ cieczy został zaprojektowany w celu oddzielenia komórek w zawiesinie na podstawie średnicy każdej komórki. Mechanizm wibracji jest stosowany do strumienia zawiesiny, co powoduje powstawanie pojedynczych kropelek.

System jest skalibrowany w celu utworzenia pojedynczej kropli z jedną komórką. Tuż przed utworzeniem kropel zawiesina przepływowa porusza się wzdłuż aparatu do pomiaru fluorescencji, który wykrywa charakterystykę fluorescencyjną każdej komórki. W miejscu powstawania kropel umieszcza się elektryczny pierścień ładujący, który ładuje się do pierścienia przed pomiarem intensywności fluorescencji. Po utworzeniu kropelek ze strumienia zawiesiny ładunek jest uwięziony w kropelkach, które następnie wchodzą do elektrostatycznego układu odchylającego. W zależności od ładunku system kieruje kropelki do różnych pojemników. Metoda nakładania opłaty różni się w zależności od różnych systemów wykorzystywanych w FACS. Sprzęt stosowany w FACS jest znany jako sorter komórek aktywowany fluorescencją.

Jakie jest podobieństwo między cytometrią przepływową a FACS?


  • Opracowano cytometrię przepływową i FACS w celu różnicowania komórek zgodnie z ich właściwościami optycznymi.

Jaka jest różnica między cytometrią przepływową a FACS?

Podsumowanie - cytometria przepływowa a FACS

Komórka jest podstawową jednostką strukturalną i funkcjonalną wszystkich żywych organizmów. Sortowanie komórek to proces, w którym komórki są izolowane i dzielone na różne kategorie na podstawie ich właściwości wewnątrzkomórkowych i zewnątrzkomórkowych. Cytometria przepływowa i FACS to dwie ważne metodologie w sortowaniu komórek. Oba procesy opracowano w celu różnicowania komórek zgodnie z ich właściwościami optycznymi. Cytometria przepływowa jest metodologią stosowaną podczas analizy heterogenicznej populacji komórek w zależności od różnych cząsteczek powierzchniowych komórek, wielkości i objętości, co pozwala na badanie pojedynczych komórek. FACS to proces, w którym próbka mieszaniny komórek jest sortowana zgodnie z ich właściwościami rozpraszania światła i fluorescencji w dwóch lub więcej pojemnikach. Jest to różnica między cytometrią przepływową a FACS.

Pobierz wersję PDF cytometrii przepływowej vs FACS

Możesz pobrać wersję PDF tego artykułu i używać go do celów offline, zgodnie z cytatem. Pobierz wersję PDF tutaj Różnica między cytometrią przepływową a FACS

Odniesienie:

  1. Cytometria przepływowa (FCM) / FACS | Sortowanie komórek aktywowane fluorescencją (FACS). Dostęp 22 września 2017 r. Dostępny tutaj Ibrahim, Sherrif F. i Ger van den Engh. „Cytometria przepływowa i sortowanie komórek”. SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1 stycznia 1970 r. Dostęp 22 września 2017 r. Dostępny tutaj

Zdjęcie dzięki uprzejmości:


  1. „Cytometr” według Kierano - opracowanie własne (CC BY 3.0) przez Commons Wikimedia „Sortowanie komórek wspomagane fluorescencją (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Opracowanie modelu modelu in vitro do badania interakcji Equus caballus IgE z receptorem FcεRI o wysokim powinowactwie (praca doktorska), The University of Sheffield, (CC BY-SA 3.0) przez Commons Wikimedia